Análisis de polimorfismos de genes implicados en la regulación del endotelio y la inflamación en pacientes con insuficiencia cardíaca y su relación con el tipo de disfunción ventricular predominante

UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
DEPARTAMENTO DE MEDICINA

“ANÁLISIS DE POLIMORFISMOS DE GENES
IMPLICADOS EN LA REGULACIÓN DEL ENDOTELIO Y
LA INFLAMACIÓN EN PACIENTES CON
INSUFICIENCIA CARDIACA Y SU RELACIÓN CON EL
TIPO DE DISFUNCIÓN VENTRICULAR
PREDOMINANTE”


María José Ruiz Olgado


DIRECTORES

Dr. D. Rogelio González Sarmiento.
Catedrático de Medicina. Departamento de Medicina. Universidad de Salamanca.
Dr. D. Cándido Martín Luengo.
Catedrático de Cardiología. Departamento de Medicina. Universidad de Salamanca

 PROF. DR. D. ROGELIO GONZÁLEZ SARMIENTO CATEDRÁTICO DE MEDICINA
DE LA UNIVERSIDAD DE SALAMANCA,
PROF. DR. D. CÁNDIDO MARTÍN LUENGO CATEDRÁTICO DE MEDICINA DE LA
UNIVERSIDAD DE SALAMANCA

CERTIFICAN

Que el trabajo presente trabajo titulado “ANÁLISIS DE POLIMORFISMOS DE
GENES IMPLICADOS EN LA REGULACIÓN DEL ENDOTELIO Y LA
INFLAMACIÓN EN PACIENTES CON INSUFICIENCIA CARDIACA Y SU
RELACIÓN CON EL TIPO DE DISFUNCIÓN VENTRICULAR PREDOMINANTE”,
realizado por Dña. María José Ruiz Olgado bajo su dirección en el Departamento de
Medicina, reúne, a su juicio, todos los requisitos suficientes para que sea presentado ante el
tribunal correspondiente y optar al grado de Doctor por la Universidad de Salamanca.


Y para que así conste, y a los efectos oportunos, firman la presente en Salamanca a uno de
septiembre de dos mil diez


















 

















A A.Gadiaga




























 AGRADECIMIENTOS

A mis tutores, por su singular paciencia y capacidad para fomentar el espíritu de
investigación, que ha sido el germen promotor de este trabajo.

A mis padres y mis amigos, por su comprensión y cariño.

A todo el personal del departamento de Medicina, en especial a Nieves y a Estrella
por su especial disposición para resolver problemas.

A Nacho por su inestimable ayuda en el análisis estadístico y sus sabias
indicaciones.

 ÍNDICE
INTRODUCCIÓN 4
1. EPIDEMIOLOGÍA DE LA INSUFICIENCIA CARDIACA
1.1 Prevalencia 5
1.2 Incidencia 7
1.3 Hospitalizaciones por Insuficiencia Cardiaca 9
1.4 Mortalidad 10
1.5 Causas predisponentes para el desarrollo de Insuficiencia Cardiaca 12
1.6 Epidemiología de la insuficiencia cardiaca con función sistólica preservada 13
1.7 Cumplimiento de objetivos en el tratamiento farmacológico
de la insuficiencia cardiaca 14

2. FISIOPATOLOGÍA DE LA INSUFICIENCIA CARDIACA
2.1 Función cardiaca normal 17
2.1.1 El ciclo cardíaco 17
2.1.2 Bases celulares de la contracción cardiaca 19

2.2 Función cardiaca anormal: Insuficiencia Cardiaca 22
2.2.1 El evento inicial 22
2.2.2 Mecanismos de compensación de la insuficiencia cardiaca 22
2.2.3 Progresión al fallo cardíaco 24
2.2.4 Remodelado de cavidades en la insuficiencia cardiaca 29

2.3 Disfunción endotelial en la insuficiencia cardiaca 30
2.3.1 La endotelina-1 en la fisiopatología de la insuficiencia cardiaca 32
2.3.2 El óxido nítrico en la fisi35
2.3.3 Relación entre la endotelina-1 y el oxido nítrico 37

2.4 La inflamación en la insuficiencia cardiaca 38
2.4.1 Citoquinas en la insuficiencia cardiaca 39
2.4.2 Interleucina-6 en la insuficiencia cardiaca 40
2.4.3 Ciclooxigenasa en la insuficiencia cardiaca 41

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3. GENÉTICA DE LA INSUFICIENCIA CARDIACA 42

3.1 Polimorfismos genéticos en la insuficiencia cardiaca 43
3.2 Polimorfismos de genes implicados en el sistema endotelial e inflamación
en la insuficiencia cardiaca 46
3.2.1 Polimorfismos del gen de la sintasa del óxido nítrico (NOS3) 46
3.2.2 Polimorfismos del gen de la endotelina-1 (END-1) 48
3.2.3 Polimorfismos de gen de la ciclooxigenasa-2 (PTGS2) 49
3.2.4 Polimorfismos del gen de la Interleucina-6 (IL-6) 50

HIPOTESIS 52
OBJETIVOS 53
1. Primario 53
2. Secundarios 53

MATERIAL Y MÉTODOS
1. POBLACIÓN A ESTUDIO 55
1.1 Selección de pacientes 55
1.2 Grupos de estudio 56

2. DISEÑO DEL ESTUDIO 57

3. MÉTODOS 58
3.1 Extracción del ADN 58
3.2 Amplificación de fragmentos del ADN mediante PCR 59
3.3 Discriminación alélica mediante digestión con nucleasas de restricción 59
3.4 Discriminación alélica mediante PCR con sondas Taqman 61
3.5 Análisis del polimorfismo Glu298Asp del gen NOS3 65
3.6 Análisis del polimorfismo Lys198Asn del gen ET-1 66
3.7 Análisis del polimorfismo 8473C>T del gen PTGS2 67
3.8 Análisis del polimorfismo -174G>C del gen IL-6 68

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