Cours RV 2006
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RETROVIRUS et VECTEURS RETROVIRAUX de type MLVMICHAUD Henri-Alexandre IGMM-CNRS 25/01/2007PLANI PrésentationQuickTime™ et undécompresseur TIFF (LZW)Classificationsont requis pour visionner cette image.StructureCycle ViralII Vecteurs RétrovirauxPrincipePréparationOptimisation de la productionConclusionIII Ciblage cellulaireCiblage tissulaireCiblage cellulaireEngineering de l’enveloppePseudotypageIV ConclusionDOGME CENTRAL DE LA BIOLOGIE MOLECULAIREADN ARNm protéineRETROVIRUSARNADN ARNm ProtéineRTClassification des Retroviridae / Orthoretroviridae/ Central, spherical coreAvian leukosis virus« C particles »Rous sarcoma virusAlpharetroviridaeEccentric, spherical coreMouse mammary tumor virusBetaretroviridaeMason-Pfizer monkey-type virus « B particles »Central, spherical coreMurine leukemia virusFeline leukemia virus « C particles »GammaretroviridaeSpleen necrosis virusCentral, spherical coreHuman T-cell leukemia virus-1Human T-cell leukemia virus-2DeltaretroviridaeBovine leukemia virusCylindrical coreSnakehead retrovirusEpsilonretroviridae « D particlesHuman immunodeficiency virus-1Human immunodeficiency virus-2LentiviridaeCone-shaped coreSimian immunodeficiency virusMurine leukemia virusvirusPlus d’une trentaine de MLV * AK7 murine leukemia virus * Murine le ukemia virus (strain BM5 ECO ) * AKT 8 murine leukemia virus * Murine leukemia vir us (strain DEF27 ) * A KV murine leukemia virus us ...
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Français
RETROVIRUS et VECTEURS RETROVIRAUX de type MLV
MICHAUD Henri-Alexandre
IGMM-CNRS
25/01/2007
III Ciblage cellulaire Ciblage tissulaire Ciblage cellulaire Engineering de lenveloppe Pseudotypage
II Vecteurs Rétroviraux Principe Préparation Optimisation de la production Conclusion
IV Conclusion
I Présentation Classification Structure Cycle Viral
PLAN
DOGME CENTRAL DE LA BIOLOGIE MOLECULAIRE
ARN
ADN
RT
ADN
ARNm
RETROVIRUS
ARNm
protéine
Protéine
Deltaretroviridae
Gammaretroviridae
Betaretroviridae
Alpharetroviridae
Central, spherical core « C particles »
Eccentric, spherical core « B particles »
Central, spherical core « C particles »
Central, spherical core
Avian leukosis virus Rous sarcoma virus
Mouse mammary tumor virus Mason-Pfizer monkey-type virus
Murine leukemia virus Feline leukemia virus Spleen necrosis virus
Human T-cell leukemia virus-1 Human T-cell leukemia virus-2 Bovine leukemia virus
Snakehead retrovirus
Human immunodeficiency virus-1 Human immunodeficiency virus-2 Simian immunodeficiency virus
Epsilonretroviridae
Lentiviridae
idirae/eRvortoretroviridae
Cone-shaped core
Cylindrical core « D particles
rOht
Plus dune trentaine de MLV
* AK7 murine leukemia virus * AK8T murineleukemiavirus *AKVmurineleukemiavirus*Amphotropicmurineleukemiavirus*CasN-S1murineleukemiavirus * Cas- Br- Emurine leukemiavirus * DG- 75 Murine leukemia virus * Dupaln murine leukemia virus * Friend murine leukemia virus * Gross passage A murine leukemia virus * HoMuLV murine leukemia virus * Kirsten murine leukemia virus * Mink cell fcous- forming MLV Minkcellfcous-formingvirus* *ML-Vlikeendogenousvirus * Moloney murine leukemia virus *Mouseendogenousmurineluekemiavirus
virus
*Murineluekemiavirus(strainBM5ECO)*Murineleukemiavuisr(strainDEF2)7MurineleukemiavuisrSL3-2* *MurineleukmeiavirusT3651/B*MurineleukemiavuisrtypeCII * Murine no-nleukeminogenic retrovirus *MurineretrovirusS-L23*MurineretrovirusS-L3 * Mus duni endogenous virus * N- tropic ecotropicendogenous retrovirus * Radiation mruine leukemia virus * Rasheed rat sarcoma virus *Rauscherminkcellfcous-formingvirus*Rauschermurineleukemiavuisr * Soule murine leukemia virus * Tikaut murine leukemia virus * Xenotropic murine leukemia vsiru
Concept tropisme et securité
Spectre dhôtes
Interférence
Enveloppes Interférantes Ecotrope Xénotrope Xénotrope Polytrope
Amphotrope 10A1 10A1 MDEV
Murines Résistance des et autres espèces Cellules de hamster TouteespècePRaéssidstealnitgenéceonnue TouteespècerPéassisdtaenltiegncéoennue
LCiegllnuéleasiresRemarques Murines (souris, rat) -NonmurinesISnofuercitsescaeullvualgeessde Murines Résistance des et autres espèces Cellules de chien
Pit-2 Pit-1 et Pit-2 ?
Récepteurs
MLV
Amphotrope 10A1 MDEV
Classes Ecotrope Xénotrope Polytrope
calisation DésignationFonctionLCohromosomique CAT-15Tarsnoptruedra a basiques(souris) XPR1 Transporteur ?1 Autre ? XPR1TAruatns?porteur?1 re
8 8 et 2 ?
Transporteur de phosphate inorg. Transporteur de phosphate inorg. ?
Sitbon et alVirologie 2001
Importance en terme de sécurité dutilisation
Tableau I :.six classes de MLV et leurs propriétés denveloppeLes .Il faut noter que dans le cas denveloppes reconnaissant le même récepteur, il ny a pas nécessairement interférence croisée (enveloppes xénotrope/polytrope et amphotrope/10A1). Pour les récepteurs autres quécotropes, les localisations chromosomiques indiquées sont celles des récepteurs humains.
foneonticafisisiportudnoitcnlCsa
Gènes (protéines) gag (CA, MA, NC)
pol (RT, PR, IN)
env (SU, TM)
Retroviral genome PSI LTRGAG POL ENV S.D. S.A.
Structure dun rétrovirus
RT IN
LTR Gag + Gag-Pol Env
Lipid Bilay
NC
TM
CA
80 à 100 nm
SU
PR
RNA
MA
5GETNITARONI
3REVERSE TRANSCRIPTION 4NUCLEAR TRANSLOCATION
7SPLICING
6NTPOICSIRRTNA
0 ADSORBTION
- INFECTION-- REPLICATION-
PROTEOLYTIC MATURATION
8 TRANSLATION
GENOMIC RNA
9 ASSEMBLY OFRNA AND VIRION PROTEINS
8
10
RELEASE BY BUDDING
CEHTFOEROANYTRENDIONOFMEMBRANESSUFACERONTI2
LTR MoMLV ELP UCRBPNF-1
GR
DR
Importance des LTR
U3 CBF bHLH Ets Ets bHLH
DR
EENNHHAANNCCEERR ((++))
MCRF
C/EBP
TATA
PROMOTOR (+)
R
U5
100 pb
ARN
RU3 PBS
RU3
RU3
RU3
Rérttoranscription
U5R
U5R
U5R
U5R
ARN (+)
ARN (+)
ADN (-)
ARN (+) ADN (-)
ARN (+) ADN (-)
ARN (+) ADN (-)
ADN (-)
ADN (-) ADN (+)
U5
R
U3
2 LTR Identiques
U5
R
U3
ADN (-)
ADN (+)
