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N° d’ordre :
THÈSE
présentée à
L’UNIVERSITÉ BORDEAUX 1
ÉCOLE DOCTORALE SCIENCES ET ENVIRONNEMENTS (ED304)
par Olivier LEPAIS
POUR OBTENIR LE GRADE DE
DOCTEUR
SPÉCIALITÉ : ÉCOLOGIE ÉVOLUTIVE, FONCTIONNELLE ET DES COMMUNAUTÉS
Sujet :
Dynamique d'hybridation dans le complexe d'espèces
des chênes blancs européens
Chênes pédonculés - Quercus robur L., sessiles - Q. petraea (Matt.) Liebl.,
pubescents - Q. pubescens Willd. et tauzins - Q. pyrenaica Willd.
Soutenue le 26 septembre 2008
Après avis de :
M. Joël CUGUEN Professeur, Université de Lille 1 Rapporteur
M. Christophe THÉBAUD Professeur, Université Paul Sabatier Toulouse Rapporteur
Devant la commission d’examen formée de :
M. Joël CUGUEN Professeur, Université de Lille 1 Rapporteur
M. Christophe THÉBAUD Professeur, Université Paul Sabatier Toulouse Rapporteur
Mme Marie-Laure DESPREZ-LOUSTAU Directrice de recherche, INRA Bordeaux Examinatrice
M. Jean-Pierre RENAUDIN Professeur, Université Bordeaux 1 Examinateur
Mme Réjane STREIFF Chargée de recherche, INRA Montpellier Examinatrice
Mme Sophie GERBER Chargée de recherche, INRA Bordeaux (Directrice de thèse) Examinatrice
UMR INRA 1202 BIOGECO
Equipe de génétique
69 route d'Arcachon
F-33612 CESTAS Cedex
2
Table des matières
Remerciements ............................................................................................... 7
Prologue ......................................................................................................... 9
Chapitre 1- Introduction................................................................................ 11
1.1. Synthèse bibliographique.......................................................................................................... 13
1.1.1. Espèce et spéciation.......................................................................................................... 13
1.1.2. Hybridation......................................................................................................................... 20
1.1.3. Conclusion ......................................................................................................................... 25
1.2. Modèle d'étude : le complexe d'espèces des chênes blancs européens ................................. 26
1.2.1. Présentation du genre Quercus......................................................................................... 26
1.2.2. Le complexe d’espèces des chênes blancs ...................................................................... 27
1.3. Objectif de la thèse ................................................................................................................... 38
PARTIE A - MÉTHODOLOGIE........................................................................ 41
Chapitre 2- Marqueurs génétiques discriminant les espèces de chênes......... 43
2.1. Introduction................................................................................................................................ 45
2.2. Mise au point d'une méthode de génotypage rapide................................................................ 46
2.2.1. Sélection de microsatellites différenciant les espèces de chênes..................................... 46
2.2.2. Sélection de microsatellites sur critères techniques.......................................................... 48
2.2.3. Mise au point du protocole................................................................................................. 50
2.3. Normalisation des données entre projets ................................................................................. 53
2.4. Calcul du taux d'erreur de génotypage ..................................................................................... 54
2.4.1. De la prise de conscience de l'erreur en génétique des populations ................................ 54
2.4.2. Estimation du taux d'erreur de génotypage....................................................................... 55
2.4.3. Conséquences des erreurs dans les analyses génétiques ............................................... 57
2.5. Conclusion................................................................................................................................. 58
Chapitre 3- Tests d'assignation génétique des espèces et des hybrides........ 61
3.1. Introduction................................................................................................................................ 63
3.2. Revue des principales méthodes d'assignation........................................................................ 64
3.2.1. Introduction ........................................................................................................................ 64
3.2.2. Classification – assignation supervisée............................................................................. 65
3.2.3. Clustering – assignation non supervisée........................................................................... 66
3.2.4. Délimitation spatiale des populations ................................................................................ 66
3.2.5. Détection des hybrides ...................................................................................................... 67
3.2.6. Conclusion ......................................................................................................................... 67
3.3. Comparaison de méthodes d'assignation................................................................................. 69
3.3.1. Introduction ........................................................................................................................ 69
3.3.2. Matériels et méthodes ....................................................................................................... 69
3.3.3. Résultats et discussions .................................................................................................... 71
3.3.4. Conclusion ......................................................................................................................... 73
3.4. Tests de sensibilité pour l'identification de deux espèces ........................................................ 76
3.4.1. Introduction ........................................................................................................................ 76
3.4.2. Matériels et méthodes ....................................................................................................... 76
3.4.3. Résultats et discussions .................................................................................................... 81
3.4.4. Conclusion ......................................................................................................................... 83
3.5. Identification des hybrides au sein d'un complexe d'espèces .................................................. 84
3.5.1. Introduction ........................................................................................................................ 84
3.5.2. Matériels et méthodes ....................................................................................................... 84
3.5.3. Données génétiques.......................................................................................................... 84
3.5.4. Résultats et discussions .................................................................................................... 86
3.5.5. Conclusion ......................................................................................................................... 91
3.6. Conclusion générale ................................................................................................................. 92
3 PARTIE B – DÉLIMITATION DES ESPÈCES, ASSIGNATION GÉNÉTIQUE EN
POPULATIONS .............................................................................................. 95
Chapitre 4- Hybridation en populations naturelles ........................................ 97
4.1. Introduction................................................................................................................................ 99
4.2. Matériels et méthodes............................................................................................................. 102
4.2.1. Echantillonnages.............................................................................................................. 102
4.2.2. Génotypage ..................................................................................................................... 102
4.2.3. Assignation des individus ................................................................................................ 103
4.2.4. Analyse phylogénétique.............