TP Microscopie
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TP 5 : Microscopie Licence Professionnelle Optronique Plate-forme optique ufr de physique Le microscope utilisé en TP présente de nombreuses fonctionnalités : fond clair, fond noir, polari- seurs croisés, contraste de phase. Il est aussi muni d'une caméra qui vous permettra de visualiser vos échantillons sur un écran d'ordinateur. Il s'agira dans une première partie de repérer les di?érents composants et comprendre leur fonc- tionnement avant de passer à la phase de réglage pour enfin examiner quelques échantillons. 1 Prise en main reconnaître les di?érents composants questions sur les caractéristiques du microscope En vous aidant des rappels de cours donnés en fin d'énoncé ?6 préciser : • Le grandissement minimum, maximum • Pourquoi faut-il privilégier des objectifs avec une bonne planéité et une correction chromatique ? • Quelle est l'utilité d'un condenseur ? d'un diaphragme de champ ? d'ouverture ? • Quelle est l'ouverture numérique maximale possible lorsque l'on travaille dans l'air ? • Quelle est la meilleure résolution que l'on puisse obtenir ? • Quel est l'avantage principal dans le fait d'utiliser des objectifs de grossissement pas trop impor- tants (
- grandissement du grossissement
- diamètre champ de vision
- micromètre constitué
- condenseur
- distance minimale de vision distincte
- diaphragme de champ
- épaisseur optique
- réglage
- réglage des anneaux pour le contraste de phase
mieuxPlate-formeQuelleopjectifstivqutilisationeestufr?depasphpysiqueeLeetmicroscopeeossibleutilis?l'onenfaitTP:pr?senobte?dephasenfaut-ilounemhromatiquebreuses?fonctionnalit?sd'ouv:nfondvclair,lafondMicroscopienoir,prinpjectifsolari-tanseursilcrois?s,acongrandis-trasteterdeanphase.conIl?est1aussidesmvunionned'unecorrectioncam?rassionnellequid'unvdiaphragmeoushampp?ermettral'ouvdemaximalevisualiserl'onvdansosQuelle?cr?solutionhanobtenirtillonsestsurtagundans?crandesd'ordigrossissemennateur.impIl(<x40)s'agirapdansautunelespremi?reecpartiesdetreppuis?rerfurles?di?rendetssyst?mecompdosanrapptstecetstrioscopiecomprendreourquoileurprivil?gierfonc-obtionnemenatecabvplan?it?anunetcde?passerQuelle?l'utilit?lacondenseurphd'unadsecde?r?glageerturepProfeourestennertureexaminerum?riquequelquesp?clorsquehantratillons.aille1l'airPriseLicenceenestmainmeilleurereconna?trequelespuissedi?ren?tsQuelcompl'aosanantsequestionscipalsurlelesd'utilisercaract?ristiquesobdudemtitropcror-osctso?pExpliquereourquoiEnvvtoujoursouscommenceraidanr?glagestvdesdesrappjectifelsdedesemencoursplusdonn?setitsenaugmennauOptroniqueetQuelsmesuretad'?nonc?son?6lespr?ciserv:tages5l'uLed'ungrand?issementrasteteminimparum,ortmaxlaihniqumdeum?TPPan2eR?glagesp2.1ermetMiseEleneplOuvrirace?Mettrelunetteunemettrepr?parationdeenagirplauacceLa(pr?glageelurephased'oignon),lautilisertiranl'nobdejectifphasegrossissemencentvisx10.pEectuerclalemise(10)aucenpestoinr?glagetehler.?lelnous'aidesedudesbouroutonpartie(5)tFleermerleledudiaphtraraH2gmetoujoursdeIlcleshampcen(1du0)amenerainsitreque(gureleemendiaphragmedd'ouvaerturei(7)corrigera.siDiaphragmegureder?sultatcir,hampappniKfoR?glagecalis?,pnitrastecenourtr?utiliserb.r?glage,Diaphragmeositionnedelacecohampafotcalis?surmaisvible,paspcendeuxtr?visualis?sc.jetCenttr?trageeteafoencalis?jectifmaisteleoudihragman'estm?trepasesttr?.trofautpsurpdeuxetitded.tragDiam?tre(9)ducondenseurdiaphragmeourdcelui-ciecencduhamphamp=c).diam?treprogressivcthdiaphragmeaemphdempvisioncec(=pilluminationdedeleKtrageon?cessaire.ehler)gureda,leriennaln'estobtenr?gl?,ce?estl'aidel?ededuob2.2outondes(3)neauxeectuerourleconr?glagedeenPhauteurceladuallonscondenseur,larecdehercelleherpla?plpusd'ungrandedeuxnettet?culaires.deslebpordsbuduendiapthraglameamodedecauhoinamlespa(gureneauxb),dansr?gtraloptiqueerermettanlaainsiviscenbpr?cisut?el'ann(4)uunecondenseurfoisfonctionlal'obhauteurcond?termin?e.sMaisdelePH1diPa2p
n = 1:5443 n = 1:55340 e
?deuxaucl?sodelamecenltrageolar(2)laamo-t,vibles.laEntserranationtolariseuroumobile,desserrand'unt?talonnerlesdevisplacerde?rercenhetragenetenen4observcrois?sandtl'odansjustela4.1lunette,hanunfaitdmiseespanneauxtreseCroiserd?place.quetteLequartzr?gcouleursldealageleconsisteet??tudiersupdeerpplusosertrelesedeuxpremieranneaux.i3fa?on?talonnageeauL'unundestrouvodessusculaireseestdemjetuniqu'd'uneobmiremmoumolettemicrom?trepconstitu?l'?paisseurdecristauxpaetitsjet,traits?paisseurr?gulip?plremenunietdespac?s.ensateur.Ildi?renfaut,enpvourdecfaithaqueSacobpjectif,neauxd?terminerdeslahecorrespdenondancebir?frinend'unetre3llaeappropri?e.microm?treEnopculaireiseturslaUntaillepdeestl'obnstall?jete?tudi?.xePnivourdecelaculaire,utiliserdeuxi?mecommeseobejetauundemicrom?trelampconstitu?d'?clairage.d'unD?terminationtraitl'?paisseurdeoblonSacgtuuneeurcouvre1jetmm0.17divis?d'?paisseurenlasegmendetsaudeoinlongueurd?terminer100de?etitsm.ous'eectuetoutEectuerul'?talonnageobppr?cisionour4.2coptiquehacunlesdesolariseurs,oblajectifs.aPr?cisezmvdeoslameincertituedescompdeRepmesure.lesphasetesD?termineretlestirerdimensionsesd'uneariationscelluledi?renced'oignon,marcd'unelorsqu'onvcoulisser?siculelame.ouhandequetoutourdequartzde?pr?ciseraquellesm?caniquel'aidetragecencesLedeautre,ob?jet?paisseurs?di?rencesvmarcotrecorrespdispnositiont.enlautilisangtcelalamem?thomicaded'observ
180 250 = = 2250
2 10
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d = 25cmm
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f
lalignescarneutrespdepdabi?revienn?tslacerith?oriquestaux,desexpliquert.vleotreed?marcduhe.neExpliquerVloureum?riquesdiraction.di?rencesl'ordreenquelquestredistingueunortcristaldeunobpl'angleeutfractur?enouNotammenab?m?lemaislamoongrossissemeno?trecristallin?cet?untsplongueuoly-uncristal.grossissemenUtiliserermettanpardimensionexemplet-grossissemenleseler?cdissemenhanttillonsdeR9surGneiss,LeM7l'angleOrthosevirtuelleoulel'observAnd?site.a5.e.ObservuneationsgrandeursdivtersescouranVtousudispcaleosezeild'uneviscouc:hUnenemti?nceraisonsdtationeg?om?triquesvertureerrel'obdansr?solulaquelle?ond'ondetla?t?edilu?ed'obtenirdemaximaltout1700,pd'observetitsjetscristauxoisineorganiques,6.1.2laIltaillededetcesgracristauxduestLedelel'ordreladenon0.5la?am.jet.Expliqueztceortquelequelveousl'obobservvezeenlequel?clairagel'obdirects'iletaend'optiquetrelepMalheureusemenolariseursgrandecrois?s.lesPcompte-tenouvqu'ellesez-vm?meousilconclured'utiliquelquedecphosetsurl'aideladetaille,desdecristauxl'imageetminimalesidistinctenon?paourquoiLigne?telPtarmiplesumopasdesobservd'observpationdeuxil:existeL'augmenl'?clairagedes?errationsfondli?enoirl'ouv(baguenDF)delesjectif.QueLavtionoit-onlimit?e?lal'aiderd'unpartelDansdispr?alit?,ositifmicroscopheroptiqueAermetquoiuncelatsert-ilde?de6pRapptelerdeobcoursde6.1vLedemicroscopmicrons.egrandissemen6.1.1tg?n?ralit?sconLetmicroscoprappecommenestong?n?ralemenletn?tudi?tengrossissemenoptiquedi?ren?l?mengrandissementaireestcommerappundeehauteuroptiquel'image,compaccessibleos?esurder?tine,l'assolciationhauteurdel'obdeuxosition,syst?mesgrossissemencenesttr?srapp:del'obsousjectifonetservl'ol'imageculaire.dePjetartraexempleerspmicroscopoursurdeuxsoussyst?mesondeeraitdistancesjfotcalesn'yrespvectiviespas2(immsansetmicrosco10e).mm,t,s?par?sassezdeconfusion180tremmdeuxetr?gne,puourfaitunemesurenimagelevirtuelleeet.?tlaestdistancetminimaleserded?nominationvisiongrossissemendistinctecommercialdeour250grandissemenmm,obtenles?loisd'udesoptiquelenfotildispleso?hercdistance4l'o??unseraitgrossissemendistancetderecioncrois?s,treolariseursvpeztrevEnouscristallins.neutretillons4.3hanconduiraient40=0:65
NA = n sin
n
z
ntrestautres1-des<Nindicationsennyum?riquesendenduhamptobypdeeliers:len?escovDgradettraste.sond'unjectif6.1.3,C'estellobel'anglescenrepr?sentilletenetluminlecagrandissemencetdeetonsl'ouv80ertuderennuneum?rique.f?tQuandcl'obmilieu,jectifdeestdirectemenaussidedestin?endauduconptrastendelenphasedlaordnotationcetPHmremplacedePselan.la160derepr?senerturetedistanceladelongueurum?rique(enquimm)ndulimit?etubuneesectionnemensuronlequelOuvilL'ouvdoitNA,?treessenviss?.jectif,0.17Surrepr?senoirte-dessous)l'?paisseurl'indice(enplusmm)ilddeequilaresplamelleluminosit?der?solutionmicroscopElleetqu'ildefaut2-placerparsurtsl'obsjet:pdeourlequeobleslaableerrationsesoienPtgminimalesgrand6.2leuresR?leluminosit?duycondenseuruIlenplect?s)ermetDeuxd'?claireredejectiffa?ondehomog?um?riquentevlelachampherturea.mp)ducommemicroscopue.uneLve?dispm)ositifdele(eetplusoptique).couranbtconest6.3leerturecondenseurum?riquedeertureKum?rique?hlerestconstitu?caract?ristiqued'unetiellesourceoblumineuse,desuivieled'unjectifsdi(vagurepihragmo?eestdeduclehampsouv(limi-ttans'agittl'indicel'illuminationl'air.duellecesthamptmicroscopiquonsableelavisible)etunelalend'untillejectif.cd?polldirectemenecdetril'indicecer?fractionquimilieu.collectedelaform?lumi?retroisdeoinlaparticusource,quiunodiaphragmetd'ouvleerturetreplaermettantille,tfod'aerjusterjetl'ouveertulenreetnbum?riqueddulacondenseurtille.enlusfonctionandelcelleseradeetl'obeiljectifseronutilis?la(don(pluscrad'aonsjusterelaxluminosit?trouvdtell'image),etetr?solution.ennautreslaract?ristiqulenstillel'obconden-d?pseurtquil'ouvfoncalise:l'illuminationsonl'oblaendetraUnailjectifethauteprofondeurseracpargral.'obobjectif,detoutqualit?encaract?ris??clairanunetnl'?couvhanntillon(1de0fa?onA<1.45homog?ne.ceLear?glagecdes?qdi?renetsceparam?tresdistancedutracondenseurailest(90capital1p?ouretl'obtenprofondeurtioncd'r?duiteunedeimagetr?solue5et
longg?n?raleuelesoobR?solutionjectifsladFetrafaibler?sultegrossissemenr?solutr?solution(5x(ou?l'image20x)tsonesttjectifdot?simage,dons.'uneXfaiblecalisationNALa(0.5du?P0.75),descriptionils(gureorenettuobne?grandepardistancepardenivtradivdailtetlat?raleuneengrandedeptrofondeur(endeccd'?talemenhamp.oinLespobtjectifsestdematiquegrandissemendisquet)supl'on?priid?aleuretit)(40x,ers100x)Elonttr?solution.uner?solutionNAnsupdite?rieurediraction.?terf?rences0.75duetondesorenract?esttraunraeconditionnanexcellenlatetionr?solution(enmaisetuneY).mani?refaiblefonctionprofondeurd?fodeconditionnanclahamp.axialeVZ).oicifonunetiillustrationnptermettanpttdePSFcomprendreourlaoinnotionSpreaddeunction)profondeurlademath?-cdehduad'Airympci-dessous.obten6.4lorsqueOptiqueobservondulatoireunLaoinformationlumineuxd'une(innimenimagepdansauunvmicroscopd'unejectif.estleladirectemenr?sultanli?etelade6.5dLaeuxconf?r?efonctionsudeobr?partitionestdelimit?elalalumi?reElleD'unedesinlaaufonctioneaud'?talemenplantdesdulumineusespoinletdudansjetleesplanyfo6cald = 0:61 =NAmin
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