MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE
27
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Français
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2001
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Niveau: Supérieur
MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE, DE LA RECHERCHE ET DE LA TECHNOLOGIE ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES SCIENCES DE LA VIE ET DE LA TERRE MEMOIRE présenté par Annick CHILTZ pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes. ETUDE DES MAPK ACTIVEES PAR DES ELICITEURS DES REACTIONS DE DEFENSE CHEZ LE TABAC soutenu le 17 septembre 2001 devant le jury suivant : Monsieur Yves BENYAMIN, président. Monsieur Ali BETTAÏEB, rapporteur. Madame Angela LEBRUN-GARCIA, examinatrice. Monsieur Silvio GIANINAZZI, examinateur. Monsieur Francis MARTY, examinateur. Laboratoire d'Immunologie et Immunothérapie des Cancers. Directeur : Pr J-F. JEANNIN E.P.H.E. (Sciences de la Vie et de la Terre) E-mail : 7, Bd Jeanne d'Arc EPHE Banque de Monographies SVT 1
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MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE, DE LA RECHERCHE ET DE LA TECHNOLOGIE ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES SCIENCES DE LA VIE ET DE LA TERRE MEMOIRE présenté par Annick CHILTZ pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes. ETUDE DES MAPK ACTIVEES PAR DES ELICITEURS DES REACTIONS DE DEFENSE CHEZ LE TABAC soutenu le 17 septembre 2001 devant le jury suivant : Monsieur Yves BENYAMIN, président. Monsieur Ali BETTAÏEB, rapporteur. Madame Angela LEBRUN-GARCIA, examinatrice. Monsieur Silvio GIANINAZZI, examinateur. Monsieur Francis MARTY, examinateur. Laboratoire d'Immunologie et Immunothérapie des Cancers. Directeur : Pr J-F. JEANNIN E.P.H.E. (Sciences de la Vie et de la Terre) E-mail : 7, Bd Jeanne d'Arc EPHE Banque de Monographies SVT 1
- ptp protéine
- samk stress-activated
- mbp protéine basique de myéline
- cellules de tabac
- mapk
- tris tris
- activation de la sipk et de la wipk
- acide salicylique
- pk dans les extraits protéiques de cellules témoins et de cellules
MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE, DE LA RECHERCHE ET DE LA TECHNOLOGIE ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES SCIENCES DE LA VIE ET DE LA TERRE MEMOIRE présenté par Annick CHILTZ pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes.
ETUDE DES MAPK ACTIVEES PAR DES ELICITEURS DES REACTIONS DE DEFENSE CHEZ LE TABAC soutenu le 17 septembre 2001 devant le jury suivant : Monsieur Yves BENYAMIN, président. Monsieur Ali BETTAÏEB, rapporteur. Madame Angela LEBRUN-GARCIA, examinatrice. Monsieur Silvio GIANINAZZI, examinateur. Monsieur Francis MARTY, examinateur. Laboratoire d'Immunologie et Immunothérapie des Cancers. Directeur : Pr J-F. JEANNIN E.P.H.E. (Sciences de la Vie et de la Terre) E-mail : jfjeanni@satie.u-bourgogne.fr 7, Bd Jeanne d'Arc
21000 DIJON UMR INRA-Université BBCE-IPM Directeur : Dr S. GIANINAZZI 17 rue Sully - BP 86510 Directeur adjoint : Pr A. PUGIN 21065 DIJON Cédex Directrice du stage : Dr A. LEBRUN-GARCIA E mail :lebrun@dijon.inra.fr -
ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES SCIENCES DE LA VIE ET DE LA TERRE
ETUDE DES MAPK ACTIVEES PAR DES ELICITEURS DES REACTIONS DE DEFENSE CHEZ LE TABAC Annick CHILTZ Soutenu le 17 septembre 2001
RESUME Deux PK sont activées précocement dans des cellules de tabac traitées par les éliciteurs cryptogéine ou oligogalacturonides, par phosphorylation sur des résidus tyrosine. Leur substratin gel, la MBP, est phosphorylé sur des résidus sérine et/ou thréonine. Des anticorps dirigés contre les MAPK animales ERK1/2 reconnaissent ces PK dans les extraits protéiques de cellules témoins et de cellules traitées, alors que les anticorps anti-MAPK phosphorylées ne les reconnaissent que dans les extraits protéiques de cellules traitées, suggérant que ces MBPK sont de la famille des MAPK et sont présentes de façon constitutive dans les cellules de tabac. Par immunoprécipitation, elles ont été identifiées comme étant la SIPK et la WIPK, des MAPK initialement caractérisées lors de leur activation respectivement par l'acide salicylique et des blessures. Les 2 MAPK sont inhibéesin vitroavec une sensibilité différente par les inhibiteurs de PK staurosporine et 5-iodotubercidine. L'activation de la SIPK et de la WIPK dans des cellules de tabac traitées par la cryptogéine se situe en aval de l'influx calcique. Afin de situer l'activation des MAPK par rapport aux autres évènements induits par la cryptogéine dans des cellules de tabac, de nombreux inhibiteurs de PP ou PK ont été testés. L'un d'entre eux, la 5-iodotubercidine est efficacein vivodès 25 M sur les 2 MAPK. L'utilisation de cet inhibiteur a permis de préciser que la production de FAO et la mort cellulaire étaient indépendantes de l'activation des MAPK dans la séquence des évènements induits par la cryptogéine sur les cellules de tabac. L'utilisation de cellules de tabac transforméesnahGa permis de démontrer que l'acide salicylique, qui a un rôle important dans les phénomènes de résistance des plantes, ne sert pas d'intermédiaire dans l'activation des MAPK induite par la cryptogéine. Des essais comparatifs d'activation avec des acides faibles n'ayant pas cette fonction biologique (acide butyrique, acide 4-hydroxybenzoïque) suggèrent un rôle potentiel, dans l'activation des MAPK, de l'acidification cytoplasmique lorsqu'elle est engendrée par les acides faibles. L'effet acidifiant reste néanmoins insuffisant pour expliquer l'intense et durable activation observée sur la SIPK et la WIPK dans des cellules de tabac traitées par la cryptogéine.
